Metoda PCR (polimerazna verižna reakcija) je "zlati standard" sodobne DNA diagnostike, zelo občutljive metode molekularne biologije. Metoda PCR se uporablja v medicini, genetiki, kriminologiji in drugih področjih. Pogosto in uspešno se uporablja pri diagnozi številnih nalezljivih bolezni.
Diagnoza nalezljivih bolezni s PCR
Test PCR omogoča odkrivanje ne samo samega patogena, temveč tudi enega samega fragmenta tuje DNA v preiskovanem materialu. Preiskovani (biološki) material je: venska kri, epitelijske celice in skrivnost genitalnega trakta, spermije, sline, sputuma in drugih bioloških izločkov. Zahtevani biološki material določa domnevna bolezen.
Metoda PCR v našem času je seveda močno diagnostično orodje. Morda je edina pomanjkljivost študije njegova visoka cena.
Na seznamu bolezni, katerih prisotnost je mogoče določiti z metodo PCR:
- virusna in bakterijska pljučnica;
- tuberkuloza;
- ošpice, rdečke, parotitis;
- nalezljivega hepatitisa vseh oblik;
- salmoneloza, davica;
- Helikobakterioza in bolezni, ki jih povzročajo črevesne okužbe;
- STD (spolno prenosljive bolezni): gonoreja, klamidija, ureaplazmoza, sifilis, AIDS, genitalni herpes, gardnerellez in drugi.
Presejanje STI z uporabo metode PCR
Za razliko od tradicionalnih analiz, tehnika PCR omogoča odkrivanje spolno prenosljivih okužb (STI), tudi če so njihovi simptomi popolnoma odsotni. Za zbiranje biološkega materiala se ženske izperejo epitelne celice cervikalnega kanala, moški - strganje sečnice. Če je potrebno, metoda PCR izvede študijo venske krvi.
Tako test STI, ki uporablja metodo PCR, omogoča identifikacijo:
- virus humane imunske pomanjkljivosti (HIV);
- bledi treponemus (povzročitelj sifilisa);
- Herpes simplex virus in citomegalovirus;
- humani papilomavirus (HPV);
- klamidija, toksoplazma, mikoplazme, ureaplazma in druge spolne okužbe.
Če se analiza PCR pravilno izvaja, je verjetnost lažno pozitivnih rezultatov izključena. Ločeno je treba omeniti humanega papilomavirusa (HPV) in pomen metode PCR za njegovo diagnozo. V nasprotju z onkocitološkim razmazom lahko metoda PCR določi specifično vrsto HPV, zlasti njegove onkogene tipe 16 in 18, katerih prisotnost ogroža žensko s tako resno in pogosto smrtno bolezen kot rak materničnega vratu . Pravočasno odkrivanje onkogenih tipov HPV po metodi PCR pogosto prinaša priložnost za preprečevanje razvoja raka materničnega vratu.
Imunoenzimska analiza (ELISA) in metoda verižne reakcije s polimerazo (PCR): pluse in minuse
Katere diagnostične metode so boljše: PCR ali ELISA? Pravi odgovor na to vprašanje ne obstaja, saj je v bistvu diagnoza s pomočjo teh dveh študij drugačna. In bolj pogosto se uporabljajo metode IFA in PTSR v kompleksu.
PCR test je potreben za določitev specifičnega povzročitelja okužbe, ga je mogoče odkriti takoj po okužbi, kljub odsotnosti simptomatskega manifestacije bolezni. Ta metoda je idealna za odkrivanje skritih in kroničnih bakterijskih in virusnih okužb.
Za razliko od tehnike PCR je metoda ELISA zasnovana tako, da ne zazna povzročitelja okužbe, temveč imunski odziv organizma na to, kar pomeni, da zazna prisotnost in količino protiteles za določenega patogena. Odvisno od vrste odkritih protiteles (IgM, IgA, IgG) lahko določimo stopnjo razvoja infekcijskega procesa.
Obe metodi ter PCR in ELISA imata visoko zanesljivost (100 oziroma 90%). Vendar je pomembno opozoriti na dejstvo, da analiza ELISA v nekaterih primerih daje lažno pozitivno (če je bila oseba v preteklosti bolna z določeno boleznijo) ali lažno negativno (če je bila okužba prejeta relativno nedavno).